Pengawasan klinis penggunaan asam folat perlu dilakukan pada pasien yang dicurigai mengalami defisiensi vitamin B12, terutama pada lansia, agar tidak memperparah gejala neurologisnya. Pemeriksaan serum folat dan vitamin B12 diperlukan untuk menegakkan diagnosa anemia defisiensi folat.

Pasien yang mengalami defisiensi asam folat perlu dievaluasi untuk kemungkinan defisiensi vitamin B12 karena keduanya sama-sama menyebabkan anemia makrositik. Pemeriksaan penunjang yang dapat dilakukan adalah pemeriksaan darah lengkap (CBC) dan apusan darah perifer.

Pemeriksaan CBC pada defisiensi asam folat menunjukkan hasil anemia, dengan penurunan hemoglobin dan hematokrit. Peningkatan MCV hingga lebih dari 100 menunjukkan anemia makrositik. Pada pemeriksaan apusan darah perifer, dapat ditemukan sel darah merah makrositik atau megaloblast dan hipersegmentasi neutrofil.[17,18]